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人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2  ，Elisa試劑盒，Elisa試劑盒價(jià)格，Elisa試劑盒說明書，Elisa試劑盒技術(shù)咨詢，Elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱：人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2    
英文名稱：Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA KIT

產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標(biāo)本齊全：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔溢液等…
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月
運(yùn)輸條件低溫運(yùn)輸，用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。

巨噬細(xì)胞（Macrophages）能夠吞沒、破壞受損傷組織，有助于啟動(dòng)康復(fù)過程。雖然它們?cè)趽p傷位點(diǎn)發(fā)揮關(guān)鍵作用，但一旦任務(wù)完成，就需要盡快撤離，結(jié)束炎癥反應(yīng)，為再生過程開路。繼續(xù)存在的巨噬細(xì)胞不利于組織恢復(fù)。

  

巨噬細(xì)胞

盡管研究人員對(duì)于啟動(dòng)巨噬細(xì)胞的分子機(jī)制研究的比較透徹，但關(guān)于其退出損傷位點(diǎn)的過程還了解甚少。研究人員鑒別出一清除外周神經(jīng)損傷位點(diǎn)巨噬細(xì)胞的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，對(duì)弄清脊髓損傷、中風(fēng)和多發(fā)性硬化中相似的分子機(jī)制提供了重要線索。已知Nogo細(xì)胞受體家族與神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)有關(guān)，SamuelDavid等觀測(cè)Nogo家族成員NgR1的作用。NgR1類受體是位于細(xì)胞膜上的蛋白開關(guān)，受到特異化學(xué)信號(hào)或配體刺激后，誘導(dǎo)細(xì)胞反應(yīng)。

　　破壞大鼠、小鼠的大腿坐骨神經(jīng)，觀察NgR1在修復(fù)過程中的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞到達(dá)損傷位點(diǎn)后，細(xì)胞表面會(huì)表達(dá)NgR1。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，受損神經(jīng)合成髓磷脂時(shí)，NgR1不僅阻止巨噬細(xì)胞與髓磷脂結(jié)合，而且直接排斥正在形成過程中的髓磷脂，若抑制髓磷脂再生，巨噬細(xì)胞會(huì)停留在損傷位點(diǎn)周圍。zui終，研究人員在髓磷脂上鑒別出特異激發(fā)排斥反應(yīng)的分子。可應(yīng)用于外周神經(jīng)以外的神經(jīng)（中樞神經(jīng)），他們發(fā)現(xiàn)中風(fēng)、多發(fā)性硬化和脊髓損傷過程中激活的巨噬細(xì)胞，表面都會(huì)表達(dá)NgR1。
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。 　　
（一）原理
　　ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法（圖a）、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。 　　
（二）操作步驟
     方法一　用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。
　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）。
　　3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
　　4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
　　5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
　　方法二　用于檢測(cè)未知抗體的間接法：　　　
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。
2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW（超純水）洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
3.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
4.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
5.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。

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